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各種ELISA試劑盒配置方法
發(fā)布時間： 2020-05-09 點(diǎn)擊次數(shù)： 1172次ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法，例如：ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。下面南京卡米洛生物的小編為您講解下各種ELISA試劑盒配置方法匯總?cè)缦拢?1) ELISA試驗(yàn)停止液(2) ELISA底物緩沖液(3) ELISA試驗(yàn)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)運(yùn)用液(4)ELISA試驗(yàn)包被緩沖液(5)ELISA試驗(yàn)洗刷緩沖液(6)ELISA試驗(yàn)稀釋液（7）規(guī)范品稀釋液。
(1) ELISA試驗(yàn)停止液(2M H2SO4)：蒸餾水178.3ml，逐滴參加濃硫酸(98%)21.7ml。(2) ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml0.1M 檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml加蒸餾水50ml。(3) ELISA試驗(yàn)包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):NaHCO3 1.59克NaHCO3 2.93克加蒸餾水至1000ml。(4) ELISA試驗(yàn)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)運(yùn)用液:TMB(10mg/5ml無水乙醇) 0.5ml底物緩沖液(PH5.5) 10ml0.75%H2O2 32μl(5) ELISA試驗(yàn)洗刷緩沖液(PH7.4 PBS)：0.15MKH2PO4 0.2克Na2HPO4·12H2O 2.9克NaCl 8.0克KCl 0.2克Tween-20 0.05% 0.5ml加蒸餾水至1000ml。(6)規(guī)范品稀釋液：PBS 1L配方pH7.2-7.4.濃度0.01mol/L：L酸二氫鉀(KH2PO4)：0.27g，L酸氫二鈉(Na2HPO4)：1.42g，氯化鈉(NaCl)：8g，KCl 0.2g，加去離子水約800mL充分拌和溶解，然后參加濃鹽酸或許氫氧化鈉調(diào)pH至7.2-7.4，后定容到1L，濃度為10mmol/L。(7) ELISA試驗(yàn)稀釋液：牛血清白蛋白(BSA) 0.1克加洗刷緩沖液至100ml或以羊血清、兔血清等血清與洗刷液配成5～10%運(yùn)用。值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉，不適合長期保存。為了保證ELISA試驗(yàn)的準(zhǔn)確性，試驗(yàn)操作中參加的緩沖液和各組分一定要準(zhǔn)確，將洗刷液參加酶標(biāo)板中的時候避免參加的試劑混入別的一個酶標(biāo)孔，謹(jǐn)防交叉污染。
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