檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。特異性抗小鼠IL-6抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本和生物素化的檢測抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的IL-6與固相抗體和檢測抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中IL-6的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
小鼠白介素6 ELISA試劑盒樣品活化方法:
生物樣品中的通常以無活性的形式存在,在檢測指標(biāo)活性前必須進(jìn)行活化處理。
活化方法如下:
血清、血漿: 280 μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入40 μL樣品,混勻,加入40 μL活化試劑1,室溫孵育10分鐘。再加入40 μL活化試劑2,混勻后立即檢測。
注意:樣品被稀釋了10倍!
細(xì)胞培養(yǎng)上清:20 μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入100 μL樣品,混勻,加入40 μL活化試劑1,室溫孵育10分鐘。再加入40 μL活化試劑2,混勻后立即檢測。
注意:樣品被稀釋了2倍!
組織勻漿:1960 μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入40 μL樣品,混勻后檢測。
注意:樣品被稀釋了50倍!
試驗所需自備物品
1. 酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙
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