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影響ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的因素有哪些？
發(fā)布時(shí)間： 2022-07-20 點(diǎn)擊次數(shù)： 924次ELISA試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗體ELISA檢測(cè)，自從60-70年代問世以來，得到科研工作者的認(rèn)可及推崇，在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣，尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。ELISA試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的特點(diǎn)，并具有操作簡(jiǎn)潔、無放射性危害的優(yōu)點(diǎn)，因此多年來廣泛應(yīng)用于各高校、學(xué)院和科研機(jī)構(gòu)的試驗(yàn)室中。通過幾年的試驗(yàn)調(diào)查，得出結(jié)論影響ELISA試驗(yàn)的要素有如下三方面：一、試劑盒1、抗原、抗體活性對(duì)效價(jià)的影響：主要是試劑中抗體(或抗原)的效價(jià)下降或失活，成果不易判別。再有ELISA試劑盒靈敏度高，對(duì)雜質(zhì)的反響靈敏度也高，試驗(yàn)中空白對(duì)照OD值偏高或假陽(yáng)性；2、酶結(jié)合物濃度過高，也會(huì)導(dǎo)致OD值假性增高。二、試驗(yàn)儀器1、加樣器是否通過校正，酶免測(cè)定血清用血量很少，如手工加樣器的功能不好，吸取樣品不，會(huì)使成果忽高忽低；2、每次洗板前，應(yīng)查看洗板機(jī)針孔有無阻塞。三、ELISA試劑盒操作1、檢測(cè)前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后運(yùn)用，試劑用完及時(shí)放回冰箱冷藏，避免形成試驗(yàn)成果假性下降；2、加樣時(shí)留意勿觸及包被板底部，避免擦傷包被物使抗體(抗原)掉落而影響試驗(yàn)成果的精確性；3、洗刷不充分，會(huì)使成果假性增高，過分洗刷呈假陰性；4、比色時(shí)應(yīng)保持包被孔底部無異物、無水汽，特別是冬天板從37℃水浴箱取出時(shí)，底部留有水汽，應(yīng)將板底擦干后進(jìn)行比色，水汽或孔內(nèi)氣泡也會(huì)使OD值升高；5、抗原與抗體反響達(dá)到*平衡，依賴于溫度與時(shí)刻。溫度高于45℃易引起失活及符號(hào)物掉落，溫度低于4℃，影響反響速度。由于ELISA試劑盒試驗(yàn)的影響要素較多，我們?cè)趯?shí)踐工作中必須操作規(guī)范、仔細(xì)，避免和排除各種要素的影響，使之得到精確可靠的查驗(yàn)成果。
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