ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內(nèi)生化領域的長足發(fā)展。
ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。
ELISA試劑盒在處理和保存方面要考慮以下幾個方面:
(⑴)要注意避免出現(xiàn)嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類以過氧化物的活性,因此,在以HRP為標記酶的ELSA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應顯色。
(2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾.
(3)血清標本如是以無菌操作分離,則可以在2~8%C下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70℃以下.
(4)冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復凍融。標本的反復凍融所產(chǎn)生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結果。此外,凍融標本的混勻亦應注意,不要進行劇烈振蕩,反復顛倒混勻即可。
(5)標本在保存中如出現(xiàn)細菌污染所致的混濁或絮狀物時,應離心沉淀后取上清檢測。
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