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怎樣知道ELISA試劑盒的真假？
發(fā)布時間： 2022-04-21 點擊次數(shù)： 917次ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來，得到科研工作者的認可及推崇，在歐美及中國獲得很大的推廣，尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展。現(xiàn)在市場上，賣試劑盒的那么多，怎樣知道產(chǎn)品的真假？針對此問題做出分析回應(yīng)，今日教您ELISA試劑盒怎么一辨真假！可利用穿插試驗即可區(qū)分ELISA試劑盒是否造假，辦法如下：1.取出購買的試劑盒A的包被板兩條；2.一條包被板加試劑盒A的規(guī)范品做規(guī)范曲線；3.另一條包被板加試劑盒B的規(guī)范品做規(guī)范曲線；4.后續(xù)操作依照試劑盒闡明書進行，加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物；5.試驗結(jié)束后，檢測兩條規(guī)范曲線，假如兩條規(guī)范曲線共同則闡明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個目標而非A和B，即該試劑盒為偽劣編造ELISA試劑盒。6.假如兩條規(guī)范曲線不共同則闡明兩個ELISA試劑盒檢測的不同目標，試劑盒A只能檢測A，不能檢測B，即該試劑盒為正常的。ELISA試劑盒實驗的注意事項：一、包被1、將包被抗原用包被緩沖液配制包被液，每孔取100 mL加入酶標板，蓋好蓋板膜，包被條件如下表，4℃ 16-20h包被時酶標板可以疊放，而37℃ 2h包被時酶標板之間的間距應(yīng)保持一致(一般為5cm)。根據(jù)培養(yǎng)箱的設(shè)計調(diào)節(jié)酶標板間的間距，如培養(yǎng)箱從底部產(chǎn)熱，則應(yīng)增加下層酶標板間的間距為10cm 。2、包被加樣采取吸二打一的方式，應(yīng)避免加在孔壁上部，若不慎滴加在孔壁上，根據(jù)該滴溶液是否應(yīng)加入孔內(nèi)再做判斷，若應(yīng)加入，則小心振蕩使其落入孔底，反之則用吸水紙小心吸出，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。3、包被前預(yù)吸查看槍頭是否合格，水流是否一致，不一致者應(yīng)更換槍頭，包被應(yīng)采用槍頭，每包被一塊板，應(yīng)將槍頭套緊，并且在包被的過程中要注意查看吸液是否一致，在包被過程中若出現(xiàn)任何小問題，都應(yīng)將此塊板做出記號，以便后期組裝入庫時淘汰。4、若采用37℃ 2h包被模式，則應(yīng)給酶標板編碼，保證每塊板子的包被時間一致。二、洗板1、包被后要進行兩次洗滌，250微升/孔，洗滌完畢后，應(yīng)在毛巾上拍干參與液體，并及時進行下一步封閉。2、 洗滌時要注意查看水流是否一致，在洗滌程中若出現(xiàn)任何小問題，都應(yīng)將此塊板做出記號，以便后期組裝入庫時淘汰。三、封閉1、封閉液應(yīng)提前一小時取出初步回溫，用前搖勻，每孔取180 mL加入酶標板，蓋好蓋板膜，37℃封閉 1.5h, 酶標板之間的間距應(yīng)保持一致(一般為5cm)。根據(jù)培養(yǎng)箱的設(shè)計調(diào)節(jié)酶標板間的間距，如培養(yǎng)箱從底部產(chǎn)熱，則應(yīng)增加下層酶標板間的間距為10cm 。2、封閉加樣采取吸一打一的方式，應(yīng)避免加在孔壁上部，若不慎滴加在孔壁上，根據(jù)該滴溶液是否應(yīng)加入孔內(nèi)再做判斷，若應(yīng)加入，則小心振蕩使其落入孔底，反之則用吸水紙小心吸出，殘留在槍頭內(nèi)的溶液不要打出 以免產(chǎn)生氣泡。并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡3、封閉前預(yù)吸查看槍頭是否合格，水流是否一致，不一致者應(yīng)更換槍頭，封閉應(yīng)采用槍頭，每封閉一塊板，應(yīng)將槍頭套緊，并且在包被的過程中要注意查看吸液是否一致，在封閉過程中若出現(xiàn)任何小問題，都應(yīng)將此塊板做出記號，以便后期組裝入庫時淘汰。四烘干裝袋1、封閉完后，摔倒孔內(nèi)液體，并在毛巾上拍干，接下來采取烘干或者晾干的方式*干燥酶標板。烘干：37 ℃倒置(不加蓋板膜或用自封袋)，每5塊板烘干30 min，隨著板子數(shù)量增多時間相應(yīng)延長，如100塊板，需要烘3 h，依次類推；晾干：底部鋪一層干凈的A4紙或者吸水紙，倒置板子，在頂層鋪一層蓋住避光，室溫晾18-24h。2、板子干燥后，應(yīng)及時裝入自封袋，按照每塊板1袋干燥劑的量裝入，袋子外面寫好板子制備日期，放入本成品庫冷藏環(huán)境保存?zhèn)溆谩?/span>
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