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發(fā)布時(shí)間： 2022-08-11 點(diǎn)擊次數(shù)： 867次ELISA試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或者抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或者抗體任然保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或者抗體即保留其免疫學(xué)活性，又保留了酶的活性，在測(cè)定時(shí)受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或者抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他的物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或者抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或者定量分析。由于酶的催化效率很高，間接的放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測(cè)定方法達(dá)到很高的靈敏度。ELISA可用于測(cè)定抗原，也可以用于測(cè)定抗體。ELSIA試劑盒導(dǎo)致結(jié)果過低的因素：1）樣本蛋白含量高低直接影響所測(cè)濃度。2）顯色時(shí)間過長(zhǎng)可能導(dǎo)致OD值整體偏高以致zui高值>2.0，但此亦不影響相對(duì)濃度。3）檢查酶標(biāo)儀紫外光波長(zhǎng)是否設(shè)置正確，此亦可能導(dǎo)致結(jié)果偏離，但不影響相對(duì)濃度。4）仔細(xì)檢查標(biāo)準(zhǔn)品是否稀釋正確，簡(jiǎn)單的辦法是看zui低濃度的那個(gè)吸光度值是不是高于說(shuō)明書的1.5倍，若高，可能有問題。
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